利福霉素钠氯化钠注射液对革兰阳性菌、阴性菌及某些非典型病原体有抗菌作用，因此可以用于多种细菌感染。
利福霉素钠氯化钠注射液能与细菌核糖体50S亚基结合，抑制依赖于RNA多聚酶的蛋白质合成，从而起到抑菌的作用。本品可透过细胞膜进入结核杆菌体内，干扰其代谢过程，使菌体失去繁殖能力而死亡。
在使用利福霉素钠氯化钠注射液时需注意肝功能监测，因为该药物可能引起肝脏损害。
利福霉素钠氯化钠注射液适用于敏感菌所致的呼吸道、消化道以及泌尿生殖道感染等疾病，但不宜长期使用。长期用药可能导致耐药菌株产生或增加药物相互作用的风险。
